Елена носова: Носова Елена Владимировна — 4 отзыва | Ростов-на-Дону — ООО Декоратор / Лепнина, фрески, фотообои, стекломазаика, декоративная штукатурка, обои, натуральные обои, напольные покрытия

Содержание

Комментарии Елена Носова

Предупреждение о риске: Торговля финансовыми инструментами и (или) криптовалютами сопряжена с высокими рисками, включая риск потери части или всей суммы инвестиций, поэтому подходит не всем инвесторам. Цены на криптовалюты чрезвычайно волатильны и могут изменяться под действием внешних факторов, таких как финансовые новости, законодательные решения или политические события. Маржинальная торговля приводит к повышению финансовых рисков.
Прежде чем принимать решение о совершении сделки с финансовым инструментом или криптовалютами, вы должны получить полную информацию о рисках и затратах, связанных с торговлей на финансовых рынках, правильно оценить цели инвестирования, свой опыт и допустимый уровень риска, а при необходимости обратиться за профессиональной консультацией.
Fusion Media напоминает, что информация, представленная на этом веб-сайте, не всегда актуальна или точна.

Данные и цены на веб-сайте могут быть указаны не официальными представителями рынка или биржи, а рядовыми участниками. Это означает, что цены бывают неточны и могут отличаться от фактических цен на соответствующем рынке, а следовательно, носят ориентировочный характер и не подходят для использования в целях торговли. Fusion Media и любой поставщик данных, содержащихся на этом веб-сайте, отказываются от ответственности за любые потери или убытки, понесенные в результате осуществления торговых сделок, совершенных с оглядкой на указанную информацию.
При отсутствии явно выраженного предварительного письменного согласия компании Fusion Media и (или) поставщика данных запрещено использовать, хранить, воспроизводить, отображать, изменять, передавать или распространять данные, содержащиеся на этом веб-сайте. Все права на интеллектуальную собственность сохраняются за поставщиками и (или) биржей, которые предоставили указанные данные.

Fusion Media может получать вознаграждение от рекламодателей, упоминаемых на веб-сайте, в случае, если вы перейдете на сайт рекламодателя, свяжитесь с ним или иным образом отреагируете на рекламное объявление.

Елена Александровна Носова

Доцент кафедры физического воспитания, заместитель директора института бизнес-коммуникаций по спортивно-массовой работе.

Контактная информация

E-mail: [email protected]
Телефон / факс: +7 (812) 315-12-75
Адрес: 191186, Санкт-Петербург, ул. Большая Морская, д. 18, каб. 402

Звания и награды

«Ветеран труда»
«Отличник физкультуры и спорта»

Образование

1986 г. – Государственный дважды орденоносный институт физической культуры им. П.Ф. Лесгафта.

2016 г. – удостоверение № 14 0487701 рег. № 592-660/97, «Повышение квалификации судей по спортивному туризму в группах дисциплин «маршруты», 24 ч., ФГБОУ ВО СПбГУПТД.
2017 г. – удостоверение № 364- 660/97, «Охрана труда», 16 ч., ФГБОУ ВО СПбГУПТД.
2017 г. – удостоверение «Повышение квалификации судей по приему норм ГТО (спортивный туризм)», 24 ч., ФГБОУ ВО СПбГУПТД.

Профессиональный опыт

В настоящее время – доцент кафедры физической культуры, заместитель директора института бизнес-коммуникаций по спортивно-массовой работе.
1975 г. – работала старшим инспектором ОК, лаборантом, преподавателем, старшим преподавателем в ЛИТЛП им. С.М. Кирова.

Ответственная за воспитательную работу в спортивно-оздоровительном лагере в поселке Стрельцово.

Общий стаж работы 43 года 2 месяца.

Стаж работы по специальности 32 года 7 месяцев.

Преподаваемые дисциплины

Практикум по физической культуре (легкая атлетика)
Физическая культура

Основные публикации

Выпущено более 47 публикаций по тематике здорового образа жизни, рекомендации студентам специального медицинского отделения, валиологии.

Мастер красоты и стилист Елена Носова г.

Санкт-Петербург

Место работы
Принимает на дому
- м. Площадь Мужества, Кушелевская дорога 5
- На карте

Услуги
Стоимость от
Наращивание ресниц 1000
руб
3D наращивание ресниц 1000
руб

Услуги	Стоимость от
Наращивание ресниц	1000 руб
3D наращивание ресниц	1000 руб

Луки (10 фото)

Если вы являетесь клиентом этого мастера, загрузите свой лук,
перетащив фотографию в эту область! Или кликни и выбери файл.

_lena_
0
_lena_
0
_lena_
0
_lena_
0
_lena_
0
_lena_
0
_lena_
0
_lena_

0
_lena_
0
_lena_
0

2014 | Program to support the theatre of small towns Russia | Проекты

Поддержка театров малых городов России традиционно входит в круг приоритетных задач Государственного Театра Наций под руководством народного артиста России Евгения Миронова. На сегодняшний день почти треть всех профессиональных театров России находится в малых городах, не областных центрах. Реализация мероприятий по поддержке театров направлена на решение одной из важнейших задач государственной культурной политики – депровинциализации малых городов нашей страны и обеспечение равного доступа к культуре для всех россиян. Одним из таких мероприятий является совместная федеральная программа Министерства культуры Российской Федерации и Государственного Театра Наций, в рамках которой, Театр Наций, помимо Фестиваля театров малых городов России, проводит цикл выездных творческих Лабораторий по современной драматургии с участием столичных режиссеров, педагогов, критиков. Программа содержит широкий комплекс различных мероприятий, направленный на развитие театральной культуры малых городов, не областных центров России и предусматривает самые разнообразные творческие потребности театров: от обеспечения их квалифицированными педагогами по различным театральным дисциплинам до оказания помощи в формировании репертуара.

В рамках выездных творческих Лабораторий, проводятся профессиональные тренинги, индивидуальные консультации и главное, создаются эскизы спектаклей, зачастую /при дальнейшей доработке/, пополняющих репертуар театров. Одна из задач Программы — познакомить творческие коллективы с новой отечественной и европейской драматургией и молодыми, но уже известными российскими режиссерами.

Организаторы выездных творческих Лабораторий Государственного Театра Наций: Олег Лоевский — арт-директор Лаборатории, театральный критик; Елена Носова – куратор театральных проектов Государственного Театра Наций.

Художественному руководству театра отправляется 30-50 пьес по современной отечественной и европейской драматургии. Театр выбирает 3-5 пьес. В каждый из городов направляется команда, состоящая из режиссеров /3-5/ из Москвы и Санкт-Петербурга, педагогов, критиков. За время работы режиссерами должны быть подготовлены эскизы спектаклей. Практика показывает, что театры принимающие участие в Лабораториях не только творчески и ответственно подходят к распределению ролей в будущих эскизах, но и очень тщательно относятся к отбору драматургического материала, учитывая как местные традиции, так и историю своего театра.

В ходе проведения Лабораторий организована работа не только с актерами, но и привлекаются зрители к процессу просмотров и обсуждений эскизов спектаклей, а также им предлагается голосование, выбрав единственный вариант из трех: «оставить, как есть», «продолжить работу», «забыть, как страшный сон». В обсуждениях эскизов спектаклей, помимо организаторов, режиссеров, столичных критиков и журналистов принимают участие представители театральной общественности городов, региональные журналисты и зрительский актив, так как одной из сопутствующих задач Лаборатории является формирование и воспитание современного зрителя. Результат зрительского голосования должен дать ответ, какие спектакли интересны зрителю. Некоторым из эскизов предстоит доработка, они будут доведены до стадии спектаклей и в дальнейшем войдут в репертуар театров. Но самое главное – каждая подобная Лаборатория приводит в зрительный зал молодежную аудиторию, привлекает внимание к театру властей города, возвращает театрам традиционный для российской глубинки статус местного очага культуры.

Семинар лаборатория в городе Ачинск.

В период работы Лаборатории с 22-27 апреля 2014 г. состоялись мастер-классы по сценической речи и сценическому движению, прошли репетиции трех эскизов спектаклей по пьесам современных авторов.

Три эскиза спектаклей на различных площадках Ачинского драматического театра представили молодые, но уже известные режиссеры: Сергей Пантыкин, Георгий Цнобиладзе, режиссер из Германии Андреас Мерц.

Организаторы Лаборатории: Олег Лоевский, арт-директор Лаборатории, театральный критик; Елена Носова – куратор театральных проектов Государственного Театра Наций, помощник художественного руководителя.

В работе Лаборатории принимают участие: Марина Гарсия Солано – педагог Школы-Студии МХАТ и Московского театрального колледжа Олега Табакова; Вячеслав Белоусов – заведующий кафедрой пластической выразительности актера ЕГТИ, художественный руководитель театра пластической драмы » SLAVТЕАТР»; Лариса Каневская — театральный критик.

Зрителям предложено не только посмотреть, но и принять участие в обсуждении эскизов спектаклей сразу же после показов, а затем и проголосовать, выбрав единственный вариант из трех: «оставить, как есть», «продолжить работу», «забыть, как страшный сон».

Семинар-лаборатория в городе Заречный Пензенской области.

С 25 октября — 1 ноября 2014 г.

В период работы состоялись мастер-классы по сценической речи и сценическому движению.

Театром были выбраны три пьесы современных драматургов, а эскизы спектаклей на различных площадках театра юного зрителя г. Заречного представили молодые, но уже известные режиссеры: Полина Стружкова (Микаэль Рамлесе «Слово как слово»), Андрей Корионов (Василий Сигарев «Гупёшка»), и Радион Букаев (Василий Сигарев «Метель»).

Организаторы Лаборатории: Олег Лоевский — арт-директор Лаборатории, театральный критик; Елена Носова – куратор театральных проектов Государственного Театра Наций, помощник художественного руководителя.

В работе Лаборатории приняли участие: Марина Гарсия Солано – педагог Московского театрального колледжа Олега Табакова; Владимир Гончаров — преподаватель по сценическому движению кафедры пластической выразительности ВТУ им. Щукина; Лариса Каневская — театральный критик.

Добро пожаловать на MaryaDesignPeople!

В разгар лета, в тридцатиградусную жару самое время покинуть душный мегаполис и приехать на берег Волги. Именно здесь, в городе Саратове, расположено одно из самых крупных и самых технологичных мебельных производств России. Скоро с конвейера Мебельной фабрики «Мария» сойдет юбилейная, четырехсоттысячная кухня. По этому приятному поводу мы организовали дизайн-тур MaryaDesignPeople для самых авторитетных дизайнеров, архитекторов и первых лиц ведущих интерьерных изданий страны.

Команду MaryaDesignPeople на фабрике в Саратове встречал генеральный директор и сооснователь Компании «Мария» Ефим Кац.

В команде MaryaDesignPeople оказались самые известные российские специалисты в области дизайна: Майк Шилов и Анастасия Панибратова, Степан Бугаев и Варвара Чеснокова («Точка дизайна», FlatPlan), Надя Зотова (Enjoy HOME), Кэти Степанова (YES-design), Борис Денисюк (Buro5), а также главный редактор журнала Architectural Digest Анастасия Ромашкевич и директор по маркетингу журнала Elle Decoration Илья Барковский.

За два дня пребывания в Саратове гостям «Марии» удалось совместить активный отдых на Волге и продуктивную работу на фабрике. Воскресный день дизайн-тура прошел на базе Surfcamp , где можно было насладиться природой, покататься на катере. Кроме производства кухонь, команда «Марии» страстно увлечена катанием на wakesurf. Всем гостям, желающим попробовать поймать свою волну, предоставили профессиональных тренеров и оборудование. Многие возможностью воспользовались, и у них получилось!

Дизайнер Анастасия Панибратова наслаждается отдыхом на базе Surfcamp.

Степан Бугаев вдохновляется живописными волжскими пейзажами («Точка дизайна», FlatPlan).

Кэти Степановой (YES-design) удалось поймать волну с первой попытки.

Рабочий понедельник начался с посещения производства. Фабрика занимает более 90 000 кв. м — это площадь, равная 13 футбольным полям, на которой установлено свыше 270 станков из Италии, Германии, Швейцарии, Японии. «Марии» действительно есть чем гордиться!

Искушенные гости, неоднократно посещавшие лучшие европейские производства, были приятно удивлены организацией производственного процесса, отметив чистоту и порядок на фабрике, униформу работников (в каждом цеху она своя и отличается по цвету), полное отсутствие запахов, что подтверждает безвредность материалов, из которых изготавливаются кухни «Мария». Самые любознательные проверили маркировку на немецких и итальянских материалах для изготовления каркасов и фасадов и убедились, что они самого лучшего качества.

Знакомство гостей с технологией кромления фасадов. На фото: Варвара Милославская и Анастасия Ромашкевич (Architectural Digest), Кэти Степанова (YES-design), Илья Барковский и Елена Носова (Elle Decoration), Майк Шилов.

Борис Денисюк (Buro5) был впечатлен масштабом производства, побывав в цеху, где каждый день изготавливается 12 000 каркасных деталей кухонь.

Майк Шилов и Кэти Степанова на фабрике покраски, где фасады кухонь шлифуют, грунтуют и декорируют краской, лаком, патиной.

Гости фабрики записывают на видео виртуозную работу робота Fanuc, который наносит на фасады краску, имитируя движение человеческой руки. На фото: Кэти Степанова (YES-design), Надя Зотова, Анастасия Ромашкевич (Archirectural Digest), Анастасия Панибратова.

Особенность производства заключается в том, что на фабрике нет конвейера в привычном понимании. Процесс организован так, что каждый заказ изготавливается индивидуально и передается из цеха в цех по цепочке: от подготовки каркасов и фасадов по индивидуальным размерам до их фрезеровки, покраски или лакировки и изготовления к готовой кухне столешницы. Результат говорит сам за себя: шоу-рум фабрики украшают стильные модели кухонь на любой вкус. В этом каждый член команды MaryaDesignPeople смог убедиться лично.

Майк Шилов в шоу-руме фабрики «Мария».

Елена Носова, Илья Барковский (Elle Decoration) на выставочном образце модели Nicolle.

Ирина Карачёва («Мария») на концепте Volna by Karim Rashid.

Среди экспонатов есть и модели, которые существуют в единственном экземпляре: концепт Antro от дизайнеров фабрики «Мария», концепт Teatro by J. D., созданный по эскизу Жерара Депардье, и, конечно, арт-объекты Volna и Klutch, разработанные знаменитым Каримом Рашидом.

После знакомства с производством и выставочными образцами гости приняли участие в воркшопе.

Директор департамента по маркетингу «Марии» Лилия Кац рассказала дизайнерам о фабрике и брендах кухонь, которые здесь производятся.

Майк Шилов, Анастасия Панибратова, Диме Рангелов (ASKO) с удовольствием поделились своим профессиональным мнением о новых разработках дизайнеров фабрики «Мария».

Дизайнеры фабрики продемонстрировали свои новейшие разработки — модели кухонь, которые только готовятся к запуску в производство. Так, гости самыми первыми смогли увидеть наши будущие новинки и поделиться с их разработчиками своим профессиональным мнением.

«Установив обратную связь с гостями, мы поняли, что организованный нами тур MaryaDesignPeople — это замечательный и полезный опыт, — рассказывает Ирина Карачева, руководитель отдела по работе с VIP-клиентами «Марии». — Активно сотрудничать с профессиональными дизайнерами интерьера, архитекторами и декораторами мы начали относительно недавно. Ранее мы уже проводили встречи на фабрике для региональных специалистов, но теперь вышли на новый уровень и организовали насыщенный тур по нашему производству для самых топовых представителей отрасли России. Теперь будем продолжать устраивать подобные мероприятия в будущем. Ждем вас на наших встречах!»

Полный отчет о двухдневном туре MaryaDesignPeople смотрите в наших социальных сетях.

Наши гости о дизайн-туре

Майк Шилов, архитектор и дизайнер интерьеров:

«Я был очень рад побывать в Саратове на фабрике «Мария». Для меня это первый опыт знакомства с современным высокотехнологичным российским мебельным производством, связанным с кухнями. Это очень интересно и необычно. Я поражен размахом работ, которые проводятся на фабрике, количеством цехов, операций — ручных и роботизированных. Я смог убедиться в том, что отечественные кухни вполне могут быть достойного уровня. Возможно, не все модели, которые я увидел, близки мне лично, как дизайнеру. Но я вижу, что они и визуально, и по внутреннему наполнению ничуть не уступают кухням, производимым на западных фабриках в этом же среднем сегменте. Конечно, от типичного ассортимента «Мария» очень отличается кухня, которую создал Карим Рашид. Хотелось бы, чтобы фабрика, оставаясь сильной в своем среднем сегменте, развивалась далее в направлении высокого дизайна. Все возможности для этого есть. Если российский рынок будет прирастать более взыскательными клиентами, то это даст возможности и для развития фабрики. И производственные предприятия, такие мощные, как фабрика «Мария», и дизайнеры, и архитекторы, — все мы заинтересованы в развитии рынка и формировании вкуса у наших потребителей. Желаю «Мария» привлекать на свою сторону профессионалов, которые смогут создавать какие-то нестандартные решения, интересные, яркие модели. Могу признаться, что был бы рад поучаствовать в подобном проекте».

Анастасия Панибратова, архитектор:

«Мне посчастливилось оказаться в компании профессионалов, которых пригласили на экскурсию по фабрике «Мария» в город Саратов. Давно я не видела таких больших и хорошо организованных производств, особенно в России. Огромнейшая территория, очень классное производство, все очень высокотехнологично, хорошо продумано, чисто — такое впечатление, что ты попал на завод Mercedes, только в кухонном производстве. «Мария» создала кухню, которую спроектировал для фабрики известный дизайнер-модернист Карим Рашид. О чем это говорит? О том, что фабрика не стоит на месте, использует все технологические новинки, которые появляются в мире, работает не только с традиционными материалами, но и с современными, например, с искусственным камнем Corian, и стремится следовать мировым тенденциям. И все это происходит не на Западе, а у нас — в Центральной России! Это отдельно хочется отметить, потому что обычными кухнями никого не удивишь. Но вот кухню от Карима Рашида не каждый себе может позволить приобрести, и не только по материальным показателям: надо еще быть ментально готовым жить в таком интерьере. Мы понимаем, что это очень узкий сегмент. Тем не менее фабрика инвестирует свое время, внимание, знания и производственные мощности в создание подобных моделей. Отметила для себя, что у меня есть пара идей, с которыми я вернусь сюда. Побывав на производстве, ты видишь гораздо больше возможностей для создания своих индивидуальных проектов. Это очень радует».

Надя Зотова, дизайнер интерьеров:

«Очень рада быть в гостях здесь, в Саратове, на фабрике кухонь «Мария». Я очень много путешествую, неоднократно бывала на европейских фабриках, которые тоже производят кухни. И честно говоря, нахожусь под большим впечатлением, что у нас в России есть такое большое технологичное производство. Для меня, как для дизайнера, очень важно, что я могу порекомендовать своим клиентам технологичное производство и мебель, которая точно не подведет меня по качеству. А еще я люблю работать с цветом, много использую его в своих проектах. Так что была рада узнать, что на фабрике кухонь «Мария» я могу, не ограничивая свою фантазию, заказать кухню любого цвета и фактуры, из любого материала. И мебель будет изготовлена специально для моего проекта. Я очень много использую нестандартных элементов, сочетаю несочетаемое. Поэтому здорово, что могу обратиться за помощью и совместно с дизайнерами Компании «Мария» придумать что-то совсем новое. Тогда мой проект станет более индивидуальным, и я смогу порадовать своих заказчиков».

№	Наименование	Ссылка на публикацию
Учебные издания
1	Чернова Е.В.Информационная безопасность человека: учебное пособие для вузов / Е.В. Чернова. — 2-е изд., испр. и доп. — Москва: Издательство Юрайт, 2020. — 243 с.	https://urait. ru/bcode/449350
2	Чернова Е.В. Информационная безопасность в образовании: сборник тестов и заданий / Е.В. Чернова. — М.: ФГУП НТЦ Информрегистр», 2019. № гос. рег. 0321900892	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/322733
3	Чернова Е.В. Практикум по информационной безопасности для бакалавров прикладной информатики: практикум — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2019. № гос. рег. 0321903487	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/325328
4	Чернова Е.В. Информационная безопасность в образовании: учебное пособие / Е.В. Чернова, Л.Ф. Ганиева. — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2017. № гос. рег. 0321603166	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/311376
5	Чернова Е.В. Методика организации внеурочной деятельности по информатике и ИКТ: методическое пособие / Е. В. Чернова, М.В. Романова. — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2017. № гос. рег. 0321704279	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/316937
6	Чернова Е.В. Хрестоматия по организации внеурочной деятельности. Информатика и ИКТ: хрестоматия / Е.В. Чернова, М.В. Романова — Москва: ФЛИНТА, 2017.	https://e.lanbook.com/book/104926
7	Чернова Е.В. Информационная безопасность для гуманитариев: учебное пособие / Е.В. Чернова. — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2017. № гос. рег. 0321702956	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/315614
8	Чернова Е.В. Информационная безопасность для гуманитариев: учебное пособие / Е.В. Чернова. — Магнитогорск: Изд-во Магнитогорск. гос. техн. ун-та им. Г.И. Носова, 2016.
9	Чернова Е. В. Применение дистанционных технологий в высшем учебном заведении: монография / Е.В. Чернова, И.И. Боброва, К.А. Рубан, Е.Г. Трофимов, Е.В. Карманова, Л.Ф. Ганиева, В.Н. Макашова. — Магнитогорск: Изд-во Магнитогорск. гос. тех. ун-та им. Г.И. Носова, 2016.
10	Чернова Е.В. Информационная безопасность: учебное пособие / Е.В. Чернова. — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2015. № гос. рег. 0321502791	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/306274
11	Чернова Е.В. Стандартизация, сертификация и управление качеством программного обеспечения: лабораторный практикум / Е.В. Чернова. — М.: ФГУП НТЦ «Информрегистр», 2015. № гос. рег. 0321502800	http://catalog.inforeg.ru/Inet/GetEzineByID/306283
Научные труды
12	Чернова Е. В. Геймификация: использование игровой механики для обучения школьников основам безопасности в сети Интернет / Е.В. Чернова, А.К. Колесникова, О.В. Пшеничная // Научно-методический электронный журнал «Концепт». – 2020. – № 6 (июнь).	http://e-koncept.ru/2020/201044.htm.
	Chernova E.V. Training teenagers to ensure their own cybersecurity / E.V. Chernova, I.V. Gavrilova // International Multi-Conference on Industrial Engineering and Modern Technologies (ISCFEC 2020) – р. 2926-2930.	https://www.atlantis-press.com/proceedings/iscfec-20/125936308
13	Чернова Е. В. Подготовка будущих учителей к превенции девиантного поведения школьников в сфере информационно-коммуникативных технологий: монография / Е.В. Чернова, Г.Н. Чусавитина. — Москва: ФЛИНТА, 2019. — 185 с. — ISBN 978-5-9765-4248-8	https://e. lanbook.com/book/123647
14	Chernova E.V. Developing a Willingness to Provide Personal Cybersecurity in Early Adolescence / E.V. Chernova, I.V. Gavrilova // The International Science and Technology Conference «FarEastСon», 2018. – Р. 752-759. URL:	https://link.springer.com/chapter/10.1007/978-3-030-18553-4_93
15	Chernova E.V. Modeling knowledge assessment with gamification technology on e-learning platform / E.V. Chernova, E.V. Karmanova, A.S. Dokolin // International Multi-Conference on Industrial Engineering and Modern Technologies (FarEastCon), 2019.	https://ieeexplore.ieee.org/abstract/document/8934089
16	Чернова Е.В. Современные аспекты распространения киберэкстремистской идеологии в молодежной ИТ-среде / Е.В. Чернова, В.Н. Макашова, И.И. Боброва // Фундаментальные исследования. 2014. № 12. часть 5. с. 1294-1297.	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=36320
17	Чернова Е.В. Формирование общих и профессиональных компетенций в курсе «Стандартизация, сертификация и управление качеством в ИТ-сфере» / Е.В. Чернова // Наука. Информатизация. Технологии. Образование.: материалы XIII международной научно-практической конференции «Новые информационные технологии в образовании и науке НИТО 2020» 24-28 февраля 2020 г. г. Екатеринбург, ФГАОУ ВО «Российский государственный профессионально-педагогический университет». – Екатеринбург, 2020. – 805 с. – с. 571-578.	https://elar.rsvpu.ru/handle/123456789/31412
18	Чернова Е.В. Опыт применения сервисов web 2.0 для предупреждения вовлечения студентов в киберэкстремистскую деятельность / Е.В. Чернова, Е.В. Карманова // Материалы научно-практической конференции «Управленческие механизмы противодействия идеологии экстремизма и терроризма» под общ. ред. Н.Р. Балынской – Магнитогорск: Изд-во Магнитогорск. гос. тех. ун-та им. Г.И. Носова. 2018. – С. 94-98.	https://elibrary.ru/item.asp?id=37523446
19	Чернова Е.В. The use of open and machine vision technologies for development of gesture recognition intelligent systems / Е.В. Чернова, К.В. Черкасов, И.В. Гаврилова, А.С. Доколин // Journal of Physics: Conf. Series 1015 (2018) 032166.	http://iopscience.iop.org/article/10.1088/1742-6596/1015/3/032166
20	Чернова Е.В. Формирование в раннем подростковом возрасте готовности к обеспечению личной кибербезопасности / Е.В. Чернова, И.В. Гаврилова, А.С. Доколин // Информатика и образование. 2018. № 7 (296). С. 16-25.	https://info.infojournal.ru/jour/article/view/320?locale=ru_RU
21	Чернова Е. В. Current status and application of fine screening technology in China / Е.В. Чернова, Д.В. Чернов // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. 2017, 87 (2).	https://iopscience.iop.org/article/10.1088/1755-1315/87/2/022005
22	Чернова Е.В. Исследование критических бизнес-процессов в социальных медиа / Е.В. Чернова, И.М. Мингазов // Корпоративная экономика. 2017, №1(9). С. 49-54.	https://www.elibrary.ru/item.asp?id=29232613
23	Чернова Е.В. Применение видеоконтента для контроля знаний в области информационной безопасности / Е.В. Чернова // Новые информационные технологии в образовании и науке: Материалы X международной научно-практической конференции. 2017. С. 559-562.	https://elar.rsvpu.ru/handle/123456789/18007
24	Чернова Е. В. Мотивация преподавателей высшей школы к формированию собственных компетенций в области информационной безопасности / Е.В. Чернова, Д.П. Полушкин, Е.Л. Трейбач // Аллея науки, 2017. Т. 2, №12. С. 72-77.	https://elibrary.ru/item.asp?id=30272773
25	Чернова Е.В. Information Technology in Business Continuity / Е.В. Чернова, М.В. Романова, И.В. Гаврилова, А.С. Доколин // Proceedings of the IV International research conference «Information technologies in Science, Management, Social sphere and Medicine» (ITSMSSM 2017). Vol. 72, Atlantis Press, Paris, France 2017. P. 283-286.	https://www.atlantis-press.com/proceedings/itsmssm-17/25887889
26	Чернова Е.В. Аналитический этап разработки стратегии управления непрерывностью бизнес-процессов для ИТ-компании / Е.В. Чернова, И.К. Скокова, Н.А. Романенко // Научные труды SWorld. 2016. Т. 2. №45. С. 46-53.	https://www.sworld.com.ua/konfer45/127.pdf
27	Чернова Е.В. Пути минимизации рисков винтернет-банкинге / Е.В. Чернова, Ф.А. Василько // Международный студенческий научный вестник. 2016. №4-4. С. 484-486.	https://www.eduherald.ru/ru/article/view?id=16388
28	Чернова Е.В. Профессиональные компетенции магистров бизнес-информатики в курсе «Управление непрерывностью бизнеса» / Е.В. Чернова // Научные труды SWorld. – Выпуск 3(44). Том 4. Иваново: Научный мир, 2016. С.22-27.	https://sworld.education/konfer44/61.pdf
29	Чернова Е.В. Intellectual Game Application for Students’ Knowledge Control / Е.В. Чернова, Т.Н. Варфоломеева, Ю. Ломакина, М.В. Романова, К.А. Рубан // Proceedings of the 2016 Conference on Information Technologies in Science, Management, Social Sphere and Medicine (ITSMSSM 2016) Vol. 51, Atlantis Press, Paris, France 2016. P.298-302.	https://www.atlantis-press.com/proceedings/itsmssm-16/25856110
30	Чернова Е.В. Teachers training for prevention of pupils deviant behavior in ICT / Е.В. Чернова, И.И. Боброва, И.Н. Мовчан, Е.Г. Трофимов, Н.Н. Зеркина, Г.Н. Чусавитина // Proceedings of the 2016 Conference on Information Technologies in Science, Management, Social Sphere and Medicine (ITSMSSM 2016) Vol. 51, Atlantis Press, Paris, France 2016. pp. 294-297.	https://www.atlantis-press.com/proceedings/itsmssm-16/25856093
31	Чернова Е.В. Этические вопросы применения информационных технологий как компонента предметного содержания подготовки студентов университета / Е.В. Чернова, Г.Н. Чусавитина, В.Н. Макашова, Н.Н. Зеркина, И.М. Кузнецова // Фундаментальные исследования. 2015. №10-2. С. 318-323.	https://www. fundamental-research.ru/ru/article/view?id=39172
32	Чернова Е.В. Учебный проект как одна из форм противодействия киберэкстремизму среди школьников / Е.В. Чернова, И.Н. Мовчан, Г.Н. Чусавитина // Фундаментальные исследования. – 2015. №9-3. С. 486-490.	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=39210
33	Чернова Е.В. Моделирование информационной инфраструктуры электронного предприятия (в медицинских организациях) / Е.В. Чернова, А.И. Бикчурина // Научные труды SWorld. – Иваново: Научный мир, 2015. Т.2. №4(41). С. 78-83.	https://sworld.education/konfer41/221.pdf
34	Чернова Е.В. Инновационные образовательные технологии в преподавании основ информационной безопасности / Е.В. Чернова // Электротехнические системы и комплексы. 2015. №1(26). С. 52-55.	https://cyberleninka.ru/article/n/innovatsionnye-obrazovatelnye-tehnologii-v-prepodavanii-osnov-informatsionnoy-bezopasnosti
35	Чернова Е.В. Обеспечение непрерывности ИТ-сервисов с использованием программно-определяемых систем хранения данных / Е.В. Чернова, Г.Н. Чусавитина, М.О. Чусавитин, С.А. Повитухин // Фундаментальные исследования. 2015. №11-3. С. 524-529.	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=39453
36	Формирование компетенций по противодействию киберэкстремистской деятельности у студентов вуза / Е.В. Чернова, А.С. Доколин, О.Л. Колобова, Л.Ф. Ганиева // Фундаментальные исследования. 2015. № 9. часть 3. с. 434-439	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=39200
37	Чернова Е.В. Киберэкстремизм в молодежной среде как социальная проблема / Е. В. Чернова, А.Н. Старков, Н.А. Старкова // Фундаментальные исследования. 2014. № 12. часть 7. С. 1550-1554.	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=36402
38	Чернова Е.В. Механизмы противодействия явлений киберэкстремистской направленности в системе электронных платежей / Е.В. Чернова, Л.З. Давлеткиреева, Е.В. Сторожева, В.А. Ошурков // Фундаментальные исследования. 2014. № 12. часть 5. с. 1089-1092.	https://www.fundamental-research.ru/ru/article/view?id=36284

Елена Носова | Россия | ACMODASI RU

ФИО

Елена Алексеевна Носова

Возраст

32 года

Актёр

Базово

Танцор

Базово

Страна

Россия

Условия работы

Срок подписания

Приду на кастинг

Готовность к переезду

Да, в любую страну

Загран паспорт

Есть

Телосложение

Стройное

Обхват груди

96 см

Обхват талии

61 см

Обхват бёдер

97 см

Размер обуви

Размер одежды

Тип внешности

Европейский

Цвет глаз

Карий

Длина волос

Ниже лопаток

Цвет волос

Тёмно-каштановый

Татуировки

Нет

Пирсинг

Несколько видимых

О себе

Боевая, яркая, могу перевоплощаться в любые образы, роли.

Легко вживаюсь в скандальные роли, могу плакать в любой момент, смеяться, менять настроение. Активная, могу сутки пахать без перерыва. Есть дочь 7 лет. Работала учителем, уволили за скандальное видео, принимала участие в программе Пусть говорят «Аффтар ржет 2018», снимаю репортажи для Блога Сочи иногда. Прогремела на Российском телевидении в январе-феврале 2018.

Хобби / увлечения

Люблю заниматься расследованиями и бороться с чиновниками за справедливость. Люблю танцевать, путешествовать, водить авто и много чего.

Опыт / Фильмография

Ссылка на эту анкету: https://www.acmodasi.ru/a_395768.html
Дата регистрации: 05 Апреля 2018 01:07
Дата обновления: 05 Апреля 2018 01:29
Был на сайте: 3 года назад
Просмотров: 781
Комментариев: 1
Популярность: 1

КОМАНДА | theizegroup

Наша команда

Ивайло Васильев, к.

б.н., MBA

София, Болгария

Я консультировался с такими компаниями, как Coca-Cola и Lufthansa, а также с правительством Болгарии. В настоящее время я являюсь соучредителем стартапа и помог многим другим в их стартапах.

Как очень опытный менеджер проектов, я могу помочь в настройке стартапов, чтобы они лучше работали в среде устоявшейся компании.Приобретения не оправдывают ожиданий из-за столкновения стилей управления и культуры. Я могу помочь смягчить эти различия.

Я говорю на болгарском, русском и английском языках, все родное.

Стив Эйткен, MBA

Торонто, Канада

Я занимался технологиями на протяжении всей своей карьеры. Я увлечен разработкой датчиков и интеграцией их в интеллектуальные устройства, чтобы сделать нашу жизнь лучше. Мне нравится возможность помочь вашей компании извлечь максимальную пользу из всех инновационных стартапов, с которыми мы работаем. Используя технологии и оттачивая правильную бизнес-модель для нацеливания на нужных клиентов, я могу помочь вашей компании продолжать внедрять инновации и расти.

Эрик Дью, PhD, MBA

Сан-Франциско, США

Я участвовал в создании стартапов последние четыре года. Я специально посещал MBA, чтобы научиться более эффективно работать со стартапами. Теперь, когда я это сделал, я хочу поделиться этим навыком со всеми стартапами.

Многие стартапы терпят поражение из-за отсутствия рынка для их продукта или услуг.Я работаю со стартапами, ища компании, которые могли бы использовать их инновации, при условии, что стартап достаточно гибкий, чтобы вносить некоторые изменения для адаптации к потребностям клиентов. Мне нравится находить алмазы в необработанном виде и помогать их полировать для более продуктивного использования.

Энди Пономарев, MBA

Москва, Россия

В IZE я специализируюсь на заключении максимально выгодных сделок M&A. Фактически, я могу помочь на всех этапах финансирования, включая серию A, мезонин, частный капитал и окончательный выход, поскольку я завершил транзакции на общую сумму более 1 доллара.4 миллиарда.

Моя цель — помочь обеим сторонам заключить максимально выгодную сделку.

Я говорю на русском и английском языках.

Елена Носова, MBA

Москва, Россия

Я профессионал с разнообразным финансовым опытом, полученным в результате работы в ведущих консалтинговых компаниях в России и Европе, таких как Ernst & Young, Horizon CF и PwC. У меня степень MBA в одной из самых международных бизнес-школ мира.Недавно я работал с корпорациями и стартапами в Силиконовой долине над разработкой стратегии, которая принесла бы ощутимую пользу. Я хотел бы помочь молодым компаниям расти во всем мире и добиваться успеха, предоставляя понимание посредством финансового анализа и определяя правильный экономический потенциал.

Я свободно говорю на английском и русском языках.

Джузеппе Пелузо, MBA

Пиза, Италия

Мой профессиональный опыт связан с деятельностью в энергетическом секторе.Энергетика — это огромная инновационная отрасль, и многие компании ищут золотое решение, сочетающее экологичные экологические технологии, конкурентоспособные цены и простоту внедрения. У меня есть контакты со многими стартапами в Европе и других странах, которые работают над достижением этих целей. Моя страсть заключается в том, чтобы найти правильный стартап в энергетическом секторе, который поможет добиться положительных преобразовательных результатов для всех нас.

Я свободно говорю на итальянском и английском языках.

Сильвия Гилле Суро, MBA

Мехико, Мексика

До получения степени MBA меня признали лучшим менеджером по продажам в Латинской Америке компании Supermax.Я хочу продолжать свои продажи, чтобы помогать стартапам находить и наращивать клиентскую базу. Меня интересуют области:

• Расширение экономических возможностей, особенно для женщин

• Образование

• Экологические проблемы, особенно экологические

сельское хозяйство

• Инновационные программы для предприятий

Я свободно говорю на английском и испанском

Джет Сон Тан, MBA

Куала-Лумпур, Малайзия

У меня большой опыт в разработке бизнес-процессов, что необходимо для любого начинающего предприятия.Кроме того, я стал соучредителем нескольких собственных стартапов, так что у меня есть личный, непосредственный опыт знания, как перейти от одного шага к другому. Ожидайте, что я помогу привести ваш стартап к успешному завершению.

Я свободно говорю на английском и малайском языках, профессионально владею хоккиеном и Тео Чу.

Махеш Эрукулла, MBA

Хайдарабад, Индия

В течение последних 10 лет я занимался ИТ-сферами на высшем уровне в таких компаниях из списка Fortune 500, как GE, Microsoft, Ford и Catepillar. После получения степени MBA я работаю в стартапе менеджером по продукту. Я полностью понимаю потребности стартапа, и мой обширный опыт может помочь найти для стартапа подходящего партнера.

Я свободно говорю по-английски, а также на хинди и телугу.

Алиса Питоефф, MBA

Париж, Франция

Имея двойной опыт работы в сфере бизнеса (MBA) и искусства и культуры, специализируясь на фотографии, у меня более 7 лет опыта в росте продаж, развитии бизнеса (как в сфере B2C, так и в сфере B2B), управлении командой и отношениях с клиентами в компаниях среднего размера. и со стартапами.

Я вырос как в Южной Азии, так и в Европе, что позволило мне глубже понять межкультурное общение и отношения. Я жажду проблем. Я наиболее известен своей способностью разрабатывать стратегию и оптимизировать любую ситуацию. Кроме того, благодаря моей обширной глобальной сети я могу предложить различные точки зрения как на управленческие, так и на стратегические решения для вашего бизнеса.

Я франко-английский двуязычный

Кристиан Фурни, MBA

Сантьяго, Чили

Я стратегический мыслитель с опытом лидерства, развития бизнеса, бизнес-стратегии и коучинга.В своей профессиональной карьере я работал менеджером в различных стартапах; как специалист по устранению неполадок в более крупных компаниях, и я тренировал многих людей, чтобы помочь им решить их личные профессиональные проблемы.

Компании, которые сегодня добиваются успеха, — это те, у которых есть заинтересованная и кросс-функциональная команда. Но они также понимают, как работает бизнес по всему миру. Я открыл новый бизнес, увеличив долю рынка за счет инновационных решений, например, за счет различных партнерских отношений с новыми и инновационными инжиниринговыми компаниями в Чили.

Мой глобальный MBA дает мне понимание корпоративных реалий и потребностей, в то время как мой сертификат коучинга и международный опыт позволяют мне лучше понимать человеческое поведение, культуру и динамику команды.

Я говорю на английском и испанском языках.

Алексей Малышев, MBA

Санкт-Петербург, Россия

Я ИТ-специалист со специализацией в области телекоммуникационного и финансового программного обеспечения.Я хорошо разбираюсь как в разработке программного обеспечения, так и в руководстве командами для завершения разработки программного обеспечения на уровне проекта.

У меня также есть опыт работы с международными командами и общения с различными клиентскими отделами.

Мой MBA делал упор на управление проектами, и я хочу помочь компаниям наладить порядок и повысить эффективность, чтобы их проекты были успешными.

Я говорю на английском и русском языках с полным профессиональным уровнем, а также на немецком и итальянском языках со знанием социальных вопросов.

Выгоняя пустоту

Гораздо больше шумихи и дискуссии вызвало скульптурное изображение дракона, которое до 2012 года стояло на площади на углу улиц Горького и Сухэ-Батора.

До появления дракона площадь была пуста. Возможно, поэтому автору удалось получить разрешение на его установку. Подарок городу сделала профессиональная кузнеца Вера Кондратьева, означающая, что дракон — символ удачи, богатства и процветания на Востоке. Кроме того, поблизости находился офис компании, основанной Верой и ее мужем, и Союзом кузнецов, поэтому за драконом регулярно ухаживали, перекрашивали и высаживали цветы вокруг него.

Довольно скоро критики увидели у скульптуры другие значения в облике дракона. Некоторые подумали, что это реклама японского ресторана через дорогу (кстати, ресторан исчез сразу после того, как дракона убрали). Другие считали, что он был установлен в честь мэра, поскольку он родился в год дракона. Третьи были категорически против неправославного символа и предлагали его демонтировать или поставить рядом с ним скульптуру Святого Георгия.

Пока взрослые обсуждали судьбу дракона, дети с удовольствием играли с ним — забирались на него и заглядывали в пасть, чтобы пересчитать клыки, а группы туристов фотографировались с мифическим существом. Однако, в отличие от скульптур рядом со стоматологической клиникой, дракон не устоял.

Возможно, потому, что он находился на открытом пространстве на глазах у всех. А возможно, это было слишком близко к центральной площади с ее административным значением. Когда городским властям было предложено устроить на месте дракона площадь, посвященную первому губернатору Иркутской области Юрию Ножикову, они решили принять предложение: память об исторических личностях более уместна в центре города. чем мифическое существо.Дракона разобрали, хотя общественное мнение было не столь однозначным. Сайт Irk.ru предложил всем пользователям выбрать новое место для дракона. Большинство комментариев касалось восстановления дракона и его установки на прежнее место, а также создания новой площади для памятника правителю.

Но именно дракону пришлось искать новое место. Сейчас, после реставрации, он стоит на территории лечебно-реабилитационного центра РЖД на Байкальском тракте.Рядом находится центр тибетской медицины. Мифический и практический Восток теперь дополняют друг друга. Находясь в центре Иркутска, географически близком к великим восточным культурам, символы Востока по-прежнему вызывают слишком много раздражения.

Исследование изолятов Mycobacterium tuberculosis, устойчивых к бедаквилину и линезолиду, из Московской области | Журнал антимикробной химиотерапии

Аннотация

Цели: Изучить изоляты с приобретенной устойчивостью к бедаквилину и линезолиду, полученные от пациентов, включенных в клиническое исследование новой схемы терапии лекарственно-устойчивого туберкулеза в Москве, Россия.

Методы: Устойчивость к линезолиду определяли с помощью MGIT 960 с критической концентрацией 1 мг / л. МИК бедаквилина определяли пропорциональным методом. Для выявления генетических детерминант устойчивости было проведено секвенирование mmpR ( Rv0678 ), atpE , atpC , pepQ , Rv1979c , rrl , rpl220 rpl21, rpl21 и .

Результаты: Всего 85 изолятов от 27 пациентов с приобретенной устойчивостью к линезолиду и пониженной чувствительностью к бедаквилину (МПК ≥0.06 мг / л). Большинство мутаций, связанных с высоким значением MIC бедаквилина, было обнаружено в гене mmpR . Мы впервые идентифицировали двух пациентов, чьи клинические изоляты имели замены D28N и A63V в AtpE, которые ранее были обнаружены только у in vitro штаммов, выбранных . У нескольких пациентов до лечения были изоляты с повышенными МПК бедаквилина; четыре из них также несли мутации в mmpR , что указывает на присутствие некоторых скрытых факторов в приобретении устойчивости к бедаквилину.Замена C154R в рибосомном белке L3 была наиболее частой у устойчивых к линезолиду штаммов. Мутации в гене 23S рРНК (g2294a и g2814t), связанные с устойчивостью к линезолиду, также были обнаружены в двух изолятах. Гетерорезистентность была выявлена в ~ 40% образцов, что отражает сложный характер приобретения устойчивости.

Выводы: Введение новых препаратов в лечение должно сопровождаться постоянным тестированием на фенотипическую чувствительность и анализом генетических детерминант устойчивости.

Введение

МЛУ-ТБ с дополнительной устойчивостью к фторхинолонам или инъекционным препаратам второго ряда и ШЛУ-ТБ представляют собой растущую угрозу общественному здоровью, требуя разработки новых лекарств и схем для успешного лечения.

Бедаквилин — новый противотуберкулезный препарат ¹ и первый препарат, специфически действующий на микобактериальную АТФ-синтазу. ² Сообщалось как о , отобранных in vitro, , так и о клинических изолятах, устойчивых к бедаквилину.¹ ^, ^3–7 Замены в субъединице с АТФ-синтазы предотвращают взаимодействие лекарственного средства с его мишенью, ⁴ ^, ⁸, тогда как мутации в репрессорном гене mmpR ( Rv0678 ) приводит к усилению экспрессии генов оттока mmpL5 и mmpS5 , обеспечивая экспорт бедаквилина, клофазимина ⁹ и эконазола. ¹⁰ Недавно была описана ассоциация мутаций потери функции в локусе pepQ с устойчивостью к бедаквилину и клофазимину.¹¹

Линезолид, одобренный FDA в 2000 году для лечения различных грамположительных инфекций, ¹² продемонстрировал бактериостатическую активность против Mycobacterium tuberculosis in vitro , а также на животных моделях. ¹² ^, ¹³ Исследования переносимости и эффективности подтвердили использование линезолида для лечения лекарственно-устойчивого туберкулеза. ¹⁴ Линезолид связывает рибосому в центре пептидилтрансферазы, ¹⁵ и устойчивые штаммы из in vitro , а клинические исследования содержат мутации в генах 23S рРНК и L3 рибосомного белка.¹² ^, ^16–18

Бедаквилин — это недавно одобренный препарат для лечения туберкулеза, безопасность и эффективность которого были проверены в нескольких клинических исследованиях в Российской Федерации. ¹⁹ ^, ²⁰ В Московском научно-клиническом центре по борьбе с туберкулезом новая схема лечения в большинстве случаев также включает линезолид, который используется в России с 2010 года. ²¹ ^, ²² Это Текущее исследование представляет собой проспективное нерандомизированное открытое исследование эффективности и безопасности схемы лечения лекарственно-устойчивого ТБ, содержащей бедаквилин, при этом некоторые результаты были опубликованы.¹⁹ Важно отметить, что пациенты с ШЛУ-формами ТБ и сопутствующими заболеваниями, такими как алкогольная или наркотическая зависимость, не были исключены из исследования. В этом отчете мы описываем фенотипические и генетические характеристики изолятов с приобретенной устойчивостью к бедаквилину и линезолиду, полученные от пациентов, включенных в это исследование.

Методы

Дизайн исследования

Это было проспективное нерандомизированное открытое исследование из-за использования лекарств, не рекомендованных для лечения туберкулеза или более длительных периодов приема. Согласно законодательству Российской Федерации, в данном случае рецепт был сделан на основании консультации врача, что привело к невозможности проведения слепого рандомизированного клинического исследования. Всего в этом исследовании были проанализированы образцы от 27 пациентов. Семьдесят восемь процентов этих пациентов принимали комбинацию основных лекарственных препаратов бедаквилина, линезолида, фторхинолонов и циклосерина / теризидона. ¹⁹

По данным этического комитета Московского научно-клинического центра по борьбе с туберкулезом, это исследование не требовало этического одобрения.Все образцы, использованные в этом исследовании, были закодированы и не содержали личной информации о пациентах, особенно имен и адресов, для сохранения их анонимности.

Образцы дыхательных путей были обеззаражены с помощью реагента BBL MycoPrep (Becton Dickinson, Cockeysville, MD, USA), содержащего N, -ацетил-1-цистеин и NaOH, в соответствии с инструкциями производителя. Часть обработанного образца использовали для автоматического культивирования Bactec MGIT 960.

Тестирование лекарственной чувствительности

Тестирование лекарственной чувствительности к стрептомицину, пиразинамиду, рифампицину, изониазиду, этамбутолу, офлоксацину, моксифлоксацину, канамицину, амикацину, пара- -аминосалициловой кислоте и этионамиду проводили с использованием Bactec MGIT 960, как описано ранее.²³ ^, ²⁴ Тесты на чувствительность к циклосерину проводили на среде Левенштейна – Йенсена с использованием критической концентрации 30 мг / л.

МИК бедаквилина (ОАО «Фармстандарт-УфаВита», Уфа, Россия; Janssen Pharmaceutica, Beerse, Бельгия) определяли на чашках с агаром Миддлбрук 7х21 с добавлением препарата в следующих концентрациях: 0,03, 0,06, 0,12, 0,25, 0,50 и 1,00 мг / л. Критерием отбора штаммов был повышенный MIC бедаквилина по сравнению с MIC для чувствительных изолятов, штамма WT h47Rv, а также ранее опубликованные данные, равные 0. 03 мг / л. ²⁵ Линезолид (Sigma-Aldrich Co., Сент-Луис, Миссури, США) определяли с использованием MGIT 960 (критическая концентрация 1 мг / л). ²⁶

Выделение и секвенирование ДНК

ДНК
из образцов и изолятов выделяли с помощью автоматизированной рабочей станции для экстракции ДНК на базе Freedom EVO ^® Clinical (Tecan Group Ltd, Меннедорф, Германия). Фрагменты mmpR ( Rv0678 ), atpE , atpC , pepQ , Rv1979c , rrl , rplC и праймеров амплифицированных генов rplD 902 (их соответствующие локусы были Таблица S1, доступная в качестве дополнительных данных по адресу JAC Online).Реакционный объем 30 мкл содержал 3 ЕД ДНК-полимеразы Qiagen HotStarTaq, 1 × буфер для ПЦР Qiagen, 3 мМ MgCl ₂ (все три были от Qiagen GmbH, Хильде, Германия), 200 мкМ каждого дНТФ (ООО «Евроген», Москва, Россия), по 1 мкМ каждого праймера и 1 мкл образца ДНК. Условия цикла ПЦР были следующими: начальная денатурация при 95 ° C в течение 4 мин; 40–50 циклов денатурации при 95 ° C в течение 40 с, отжиг при определенной температуре праймера (таблица S1) в течение 30 с, удлинение при 72 ° C в течение 30 с; и окончательное удлинение при 72 ° C в течение 5 мин.Фрагменты очищали из агарозных гелей с использованием набора для экстракции гелей MinElute (Qiagen GmbH, Hilde, Германия) и подвергали дидезоксисеквенированию с использованием ABI Prism BigDye Terminator версии 3.1 (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA).
Результаты
Выбор клинических изолятов
Изоляты пациентов, получавших бедаквилин и линезолид в своей схеме лечения, были проанализированы с использованием комбинации фенотипических и генетических методов.Как описано ранее, ряд экспериментов с h47Rv и пан-чувствительными изолятами от первичных случаев туберкулеза подтвердил, что значение MIC для чувствительных к бедаквилину штаммов составляет 0,03 мг / л. ²⁵
Штаммы с пониженной чувствительностью к бедаквилину, имеющие значения МИК ≥0,06 мг / л, были отобраны для детального генетического анализа. В целом повышенные МПК бедаквилина по крайней мере для одного изолята были обнаружены у 24 пациентов (из 116 проанализированных; данные не показаны).
Для 7 из 24 случаев МПК 0.06–0,25 мг / л были идентифицированы в исходных культурах, предшествовавших лечению (таблица 1). В двух из семи случаев посевы быстро стали отрицательными после начала лечения, и посевы после лечения не были получены. В четырех из пяти случаев МПК бедаквилина повышалась во время лечения и в одном случае не изменялась.
Таблица 1
Попарное сравнение исходных и последующих изолятов лечения бедаквилином от одного и того же пациента
9044 9044 9044 9044 . 032 9044 9044 904 904 9040 D28N 904 904 WT Ca 9044 9044 9044
9044 9044
9044 9044 WT 9044 0,12
9044 WT .03 904 904
Код пациента . Профиль сопротивления . Изолят для предварительной обработки бедаквилина
. Изолят бедаквилина после лечения
.
МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . мутации в AtpE .
Af XDR 0,25 L142R 1,00 L142R A63V
Ci X404 9044 9044 9044 9044 9044 9044 904
Cy XDR 0,06 Del32g 0,25 Del32g WT
Bc pre-XDR 0.06 WT 0,25 (Del435t) WT
Do XDR 0,06 WT 0,06 (Del214g40) 9044 9044 9044 9044 WT 9044 9044 9044 XDR 0,03 WT 0,25 Ins139g WT
Bg XDR 0,03 WT 0,25 0,25 WT 0,12 M23L Ins419g WT
BS poly 0,03 WT 0,12 (Del198G) (Del198g) (Del198g) (Del198g) (E19890) (Del198g) (E198)
Bu MDR 0,03 WT 0,12 V85A WT
Dp XDR 0,03 WT (F79S) (Ins137g) WT
Eq до XDR 0,03 WT 0,12 WT D28N 0,12 WT WT
Ei MDR 0,03 WT 0,12 WT WT
3 WT 0,06 Ins44a WT
Bn XDR NA NA 0,25 (S53P) (Del196g) 9044 9044 9044 9044 9044 поли NA NA 0,25 Ins421g WT
El XDR NA NA 0,25 A98V 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA NA 0. 12 (Del198g) (Del212c) (G78A) WT
Di XDR NA NA 0.12 L122P W20 9044 9044 9044 L122P 9044 9044 9044 NA 0,12 (Delg19g) (Del198g) WT
Fb MDR NA NA 0,12 (C46R4) (Ins139 9044 9044) (Ins139 9044 9044 Ae XDR 0.12–0,25 (Ins139g) NA NA NA
Bd poly 0,25 G121E NA NA 9040 904 904 9040 . Профиль сопротивления . Изолят для предварительной обработки бедаквилина
. Изолят бедаквилина после лечения
.
МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . мутации в AtpE .
Af XDR 0,25 L142R 1,00 L142R A63V
Ci X40 6 WT 0,25 (Ins144c) WT
Cy XDR 0,06 Del32g 0,25 Del324 W404 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 0,06 WT 0,25 (Del435t) WT
Do XDR 0,06 WT 0,06 (Del214g40) 9044 9044 9044 9044 9044 9044 XDR 0.03 WT 0,25 Ins139g WT
Bg XDR XDR 0,03 WT 0,25 Del293c 0,12 M23L Ins419g WT
BS поли 0,03 WT 0,12 (Del19g) (E49stop40 9020 9044 9044 9044) Ins Del198g 9044 9044 9044 MDR 0. 03 WT 0,12 V85A WT
Dp XDR 0,03 WT 0,12 (F79S4
9044 9044 9044 9044) (Ins137g XDR
0,03 WT 0,12 WT D28N
Du XDR 0,03 WT 0,12 WT 0,12 WT WT
Ca XDR 0,03 WT 0,06 Ins44a WT 9044 9044 9044 NA 9044 9044 9044 0,25 (S53P) (Del198g) (Del336c) WT
Co poly NA NA 0,25 Ins421g 9044 9044 9044 9040 Ins421g 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA NA 0.25 A98V WT
Al XDR NA NA 0,12 (Del198g) (Del212c) (G78A) X 404 9044 9044 9044 9044 NA 0,12 L122P WT
Dv XDR NA NA 0,12 (Delg19g) (Del198g4 9044 9044 9044 9044) (Del198g4 9044 9044) NA 0. 12 (C46R) (Ins139tg) (L40S) WT
Ae XDR 0,12–0,25 (Ins139g) NA NA
904 904
NA 0,25 G121E NA NA NA
Таблица 1
Парное сравнение исходных и последующих изолятов лечения бедаквилином от одного и того же пациента
9044 9044 9044 9044 .032 9044 9044 904 904 9040 D28N 904 904 WT Ca 9044 9044 9044
9044 9044
9044 9044 WT 9044 0,12
9044 WT .03 904 904
Код пациента . Профиль сопротивления . Изолят для предварительной обработки бедаквилина
. Изолят бедаквилина после лечения
.
МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . мутации в AtpE .
Af XDR 0,25 L142R 1,00 L142R A63V
Ci X404 9044 9044 9044 9044 9044 9044 904
Cy XDR 0,06 Del32g 0,25 Del32g WT
Bc pre-XDR 0. 06 WT 0,25 (Del435t) WT
Do XDR 0,06 WT 0,06 (Del214g40) 9044 9044 9044 9044 WT 9044 9044 9044 XDR 0,03 WT 0,25 Ins139g WT
Bg XDR 0,03 WT 0,25 0,25 WT 0,12 M23L Ins419g WT
BS poly 0,03 WT 0,12 (Del198G) (Del198g) (Del198g) (Del198g) (E19890) (Del198g) (E198)
Bu MDR 0,03 WT 0,12 V85A WT
Dp XDR 0,03 WT (F79S) (Ins137g) WT
Eq до XDR 0,03 WT 0,12 WT D28N 0,12 WT WT
Ei MDR 0,03 WT 0,12 WT WT
3 WT 0,06 Ins44a WT
Bn XDR NA NA 0,25 (S53P) (Del196g) 9044 9044 9044 9044 9044 поли NA NA 0,25 Ins421g WT
El XDR NA NA 0,25 A98V 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA NA 0. 12 (Del198g) (Del212c) (G78A) WT
Di XDR NA NA 0.12 L122P W20 9044 9044 9044 L122P 9044 9044 9044 NA 0,12 (Delg19g) (Del198g) WT
Fb MDR NA NA 0,12 (C46R4) (Ins139 9044 9044) (Ins139 9044 9044 Ae XDR 0.12–0,25 (Ins139g) NA NA NA
Bd poly 0,25 G121E NA NA 9040 904 904 9040 . Профиль сопротивления . Изолят для предварительной обработки бедаквилина
. Изолят бедаквилина после лечения
.
МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . МИК бедаквилина (мг / л) . мутации в MmpR ^a . мутации в AtpE .
Af XDR 0,25 L142R 1,00 L142R A63V
Ci X40 6 WT 0,25 (Ins144c) WT
Cy XDR 0,06 Del32g 0,25 Del324 W404 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 0,06 WT 0,25 (Del435t) WT
Do XDR 0,06 WT 0,06 (Del214g40) 9044 9044 9044 9044 9044 9044 XDR 0.03 WT 0,25 Ins139g WT
Bg XDR XDR 0,03 WT 0,25 Del293c 0,12 M23L Ins419g WT
BS поли 0,03 WT 0,12 (Del19g) (E49stop40 9020 9044 9044 9044) Ins Del198g 9044 9044 9044 MDR 0. 03 WT 0,12 V85A WT
Dp XDR 0,03 WT 0,12 (F79S4
9044 9044 9044 9044) (Ins137g XDR
0,03 WT 0,12 WT D28N
Du XDR 0,03 WT 0,12 WT 0,12 WT WT
Ca XDR 0,03 WT 0,06 Ins44a WT 9044 9044 9044 NA 9044 9044 9044 0,25 (S53P) (Del198g) (Del336c) WT
Co poly NA NA 0,25 Ins421g 9044 9044 9044 9040 Ins421g 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA NA 0.25 A98V WT
Al XDR NA NA 0,12 (Del198g) (Del212c) (G78A) X 404 9044 9044 9044 9044 NA 0,12 L122P WT
Dv XDR NA NA 0,12 (Delg19g) (Del198g4 9044 9044 9044 9044) (Del198g4 9044 9044) NA 0. 12 (C46R) (Ins139tg) (L40S) WT
Ae XDR 0,12–0,25 (Ins139g) NA NA
904 904
NA 0,25 G121E NA NA NA
В 10 случаях МПК бедаквилина увеличилась с 0,03 мг / л до различных уровней до 0,25 мг / л, а у 7 пациентов исходные культуры не были имеется в наличии.Таким образом, исходные и последующие изоляты из пациентов, получавших бедаквилин, были доступны от 15 пациентов.
Изоляты, устойчивые к линезолиду, были получены от 10 пациентов. У трех пациентов были подтвержденные случаи приобретения резистентности во время лечения (пациенты Bc, Bg и Ci в таблице 2), и МПК бедаквилина также была повышена в этих случаях. Соответствующие исходные изоляты для четырех дополнительных изолятов (пациенты Ab, Bn, Di и Ee) не были доступны; однако в случае пациента Di первый изолят, полученный во время курса лечения, был чувствителен к линезолиду и бедаквилину, а последующие изоляты продемонстрировали устойчивость к обоим препаратам (таблица S2). Три пациента с устойчивыми изолятами (Cy, Ae и Fa) ранее получали линезолид. Кроме того, для них не было доступных исходных изолятов.
Таблица 2
Сравнение изолятов до и после лечения линезолидом
9044 9044 904 904 9044 WT 9044 NA 9044 9044
Код пациента . Линезолид изолят для предварительной обработки
. Линезолид изолят после лечения
.
R / S . мутации . R / S . мутации в rplC ^a . мутации в rrl ^a .
Bc S WT R t460c, C154R WT
Bg S 4 W40 R 9044 (9044) 9044 (9044) 9044 или C154S WT
Ci S WT R t460c, C154R WT
Cy NA 9044 9044 9044 9044 9044 Cy NA Ab NA NA R t460c, C154R WT
Ae NA NA R t4601 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA R t460c, C154R WT
Ee NA 904 41 NA R t460c, C154R (g2294a)
Fa NA NA R t460c, C154R R t460c, C154R WT
9044 9044 904 904 9044 WT 9044 NA 9044 9044
Код пациента . Линезолид изолят для предварительной обработки
. Линезолид изолят после лечения
.
R / S . мутации . R / S . мутации в rplC ^a . мутации в rrl ^a .
Bc S WT R t460c, C154R WT
Bg S 4 W40 R 9044 (9044) 9044 (9044) 9044 или C154S WT
Ci S WT R t460c, C154R WT
Cy NA 9044 9044 9044 9044 9044 Cy NA Ab NA NA R t460c, C154R WT
Ae NA NA R t4601 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA R t460c, C154R WT
Ee NA 904 41 NA R t460c, C154R (g2294a)
Fa NA NA R t460c, C154R R t460c, C154R WT
Таблица 2
Сравнение изолятов до и после лечения линезолидом
9044 9044 904 904 9044 WT 9044 NA 9044 9044
Код пациента . Линезолид изолят для предварительной обработки
. Линезолид изолят после лечения
.
R / S . мутации . R / S . мутации в rplC ^a . мутации в rrl ^a .
Bc S WT R t460c, C154R WT
Bg S 4 W40 R 9044 (9044) 9044 (9044) 9044 или C154S WT
Ci S WT R t460c, C154R WT
Cy NA 9044 9044 9044 9044 9044 Cy NA Ab NA NA R t460c, C154R WT
Ae NA NA R t4601 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA R t460c, C154R WT
Ee NA 904 41 NA R t460c, C154R (g2294a)
Fa NA NA R t460c, C154R R t460c, C154R WT
9044 9044 904 904 9044 WT 9044 NA 9044 9044
Код пациента . Линезолид изолят для предварительной обработки
. Линезолид изолят после лечения
.
R / S . мутации . R / S . мутации в rplC ^a . мутации в rrl ^a .
Bc S WT R t460c, C154R WT
Bg S 4 W40 R 9044 (9044) 9044 (9044) 9044 или C154S WT
Ci S WT R t460c, C154R WT
Cy NA 9044 9044 9044 9044 9044 Cy NA Ab NA NA R t460c, C154R WT
Ae NA NA R t4601 9044 9044 9044 9044 9044 9044 NA R t460c, C154R WT
Ee NA 904 41 NA R t460c, C154R (g2294a)
Fa NA NA R t460c, C154R R t460c, C154R WT
У 11 пациентов, получавших линезолид, резистентность не развивалась. Кроме того, пять пациентов не получали линезолид во время терапии, в первую очередь из-за токсических побочных эффектов, а один пациент (Bd) быстро стал отрицательным после начала лечения.
У шести пациентов развилась устойчивость как к линезолиду, так и к бедаквилину во время лечения (пациенты Bc, Bg, Ci, Cy, Bn и Di в таблице S2), и один пациент (Ae) с устойчивостью к линезолиду не получал бедаквилин. Поэтому в исследование были добавлены три пациента с изолятами, устойчивыми к линезолиду и чувствительными к бедаквилину, в дополнение к 24 случаям, упомянутым выше.В результате для дальнейшего анализа было отобрано 85 культуральных изолятов от 27 пациентов. Сводная информация о тестировании на лекарственную чувствительность и генетическом анализе всех изолятов, описанных в этом исследовании, представлена в таблице S2.
Идентификация мутаций, связанных с повышенным МПК бедаквилина
Шестьдесят пять изолятов от 24 пациентов имели МИК бедаквилина ≥0,06 мг / л. Были секвенированы пять геномных локусов для выявления мутаций, связанных с устойчивостью к бедаквилину: mmpR ( Rv0678 ), atpE , atpC , pepQ и Rv1979c .Замены были выявлены в 52 из 65 изолятов (рис. 1). У 26 изолятов наблюдали данные хроматограммы смешанного секвенирования, и их исследовали вручную.
Рисунок 1
Распределение МПК бедаквилина для проанализированных клинических изолятов. Изоляты с идентифицированными мутациями в генах mmpR и atpE обозначены черными полосами, тогда как изоляты без мутаций обозначены светло-серыми полосами.
Рисунок 1
Распределение МПК бедаквилина для проанализированных клинических изолятов.Изоляты с идентифицированными мутациями в генах mmpR и atpE обозначены черными полосами, тогда как изоляты без мутаций обозначены светло-серыми полосами.
В штаммах с повышенными МПК бедаквилина большинство мутаций было обнаружено в гене mmpR (в 51 из 65 штаммов). Из-за природы механизма устойчивости, при котором инактивация репрессора MmpR увеличивает отток бедаквилина, мутации были распределены почти случайным образом по открытой рамке считывания.Были идентифицированы как мутации сдвига рамки считывания, так и аминокислотные замены (таблица 1). Были идентифицированы горячие точки мутаций в нуклеотидах 139 и 198; изоляты от трех и пяти пациентов, соответственно, несли точно такую же мутацию в этих положениях (Таблица S3).
Шесть изолятов от двух пациентов содержали аминокислотные замены в AtpE: D28N и A63V. У пациента Af замена AtpE (A63V) возникла во время лечения в дополнение к существующему MmpR (L142R), и было зарегистрировано промежуточное смешанное состояние WT и мутантных последовательностей (Таблица S2).
У семи пациентов изоляты с повышенными МПК бедаквилина были обнаружены до лечения бедаквилином: три из них имели высокие МПК, 0,12–0,25 мг / л, а четыре имели промежуточные МПК, 0,06 мг / л, которые также были выше. чем у чувствительных изолятов от первичных случаев ТБ. В трех случаях с высоким МИК и в одном случае с промежуточным МИК были выявлены замены в MmpR (таблица 1). Мутаций не обнаружено в генах atpC , pepQ или Rv1979c .
Идентификация мутаций, связанных с устойчивостью к линезолиду
Мутация t460c в гене rplC , приводящая к замене C154R в рибосомном белке L3, ¹⁸, была обнаружена в 9 из 10 изолятов, устойчивых к линезолиду (таблица 2). Два последовательных изолята от одного пациента содержали неоднозначные хроматограммы секвенирования в двух положениях в rplC : смесь c и a вместо t на 460 и смесь g и t на нуклеотиде t462 (рисунок S1).Без анализа последовательностей отдельных клонов эта ситуация приводит к двум возможным вариантам замещающих смесей RplC: C154R + C154R и C154R + C154S.
Три типа мутаций были обнаружены в последовательности гена 23S рРНК в изолятах, устойчивых к линезолиду: c1921t, g2294a и g2814t. Позиция 1921 принадлежит домену IV 23S рРНК, вдали от пептидилтрансферазного центра, и поэтому маловероятно, что она связана с устойчивостью к линезолиду. Второй, g2294a, был обнаружен в смешанной популяции вместе с последовательностью WT.В нумерации Escherichia coli он соответствует нуклеотиду 2056, который спарен по основанию с c в нуклеотиде 2612. Замена на a в этом положении была обнаружена в Mycobacterium smegmatis , устойчивом к линезолиду. ²⁷ Третья мутация, g2814t (2576 в нумерации E. coli ), ранее была обнаружена у различных устойчивых к линезолиду организмов, ¹⁷, и этот изолят не имел мутаций в rplC . В гене rplD мутаций выявлено не было.
В отличие от генетики чувствительности к бедаквилину, смеси последовательностей в генах rrl и rplC были менее разнообразными, и изоляты переходного состояния не были идентифицированы. Смеси были обнаружены в трех изолятах от двух пациентов (таблица S2).
Обсуждение
Лечение МЛУ и ШЛУ ТБ — сложная задача из-за небольшого количества эффективных препаратов и высокого риска побочных эффектов. Существует потенциальный риск приобретения дополнительной лекарственной устойчивости из-за неправильного лечения и легочных осложнений, таких как обширные поражения.²⁸ После клинического исследования новых схем, включая недавно одобренные препараты бедаквилин и линезолид, проведенного в Московском научно-клиническом центре по борьбе с туберкулезом, мы исследовали устойчивость к этим двум препаратам и проанализировали генетические детерминанты этой устойчивости у клинических изолятов. полученные от пациентов.
Сравнение значений МПК бедаквилина и наличия мутаций, связанных с устойчивостью к бедаквилину, показало неоднозначные результаты при двух серийных разведениях: большинство штаммов с МПК равным 0.12 мг / л содержали замены, хотя некоторые не имели, и противоположная ситуация наблюдалась для МИК 0,06 мг / л. Во всех изолятах с более высокими значениями MIC были идентифицированы различные замены, и все штаммы с MIC 0,03 мг / л имели WT-последовательности исследуемых генов. Хотя мы проанализировали последовательности пяти известных генов, мы предполагаем существование некоторого другого механизма устойчивости к бедаквилину, что также подтверждается наличием идентичных мутаций в изолятах с разными MIC.
Большое количество мутаций сдвига рамки считывания и аминокислотных замен было идентифицировано в репрессорной последовательности mmpR изолятов с повышенными значениями MIC бедаквилина.Хотя в этом исследовании было идентифицировано несколько горячих точек в mmpR , подтверждая предыдущие наблюдения in vitro- отобранных штаммов, устойчивых к клофазимину, ²⁹ мутации в основном распределены по всему гену, что согласуется с механизмом устойчивости. ⁹ Это усложняет разработку методов молекулярной диагностики, отличных от прямого секвенирования всей ORF, такая же ситуация, что и для гена pncA при устойчивости к пиразинамиду ³⁰ и гена tlyA при устойчивости к капреомицину. ³¹ Кроме того, следует отметить, что, в отличие от инактивации мутаций сдвига рамки считывания, аминокислотные замены не обязательно изменяют функциональные свойства репрессора.
Ранее в клинических изолятах были идентифицированы только мутации в mmpR , ⁶ ^, ⁷ ^, ³² ^, ³³, тогда как мутанты, отобранные in vitro, также несут замены в субъединице . АТФ-синтазы.¹ ^, ⁵ Мы определили два новых типа замен, связанных с повышением МИК бедаквилина: D28N и A63V в AtpE. Насколько нам известно, эти точные замены ранее не описывались: в ряде исследований D28 был заменен на P, V, A или G, а A63 был заменен на P. ¹ ^, ^3–5 Нет стоимость пригодности для мутаций AtpE была обнаружена in vitro ³ согласно расчетам КОЕ; однако более низкая частота таких мутаций в клинических изолятах потенциально указывает на то, что они требуют дополнительных затрат in vivo .
У семи пациентов до лечения были обнаружены изоляты с повышенными МИК бедаквилина, три из которых имели высокие МИК. Четыре штамма имели замены в MmpR, аналогично выводам Torrea et al. ³³ При анализе базы данных GMTV, содержащей геномные данные о ~ 2000 российских изолятах, только 1 штамм с мутацией сдвига рамки считывания и 13 изолятов с несинонимичными аминокислотными заменами в MmpR были обнаружены с использованием порога качества, рекомендованного авторами.³⁴ Это гораздо более низкая частота мутаций по сравнению с нашими данными, хотя доля штаммов МЛУ и ШЛУ в этой базе данных неизвестна. Вариабельность МПК бедаквилина для изолятов, ранее не подвергавшихся действию препарата, может быть связана с изменениями в регуляторной сети толерантности к бедаквилину ³⁵, на которую влияет предшествующий анамнез лечения или наличие прежнего селективного давления со стороны неизвестных факторов. В нашем исследовании у всех таких пациентов была хроническая форма туберкулеза в течение многих лет, и они не получали ранее лечения бедаквилином или клофазимином. Однако большинство из них (пять из семи, исключая пациентов Ae и Bc) ранее лечились азольными препаратами (флуконазолом, итраконазолом, вориконазолом и т. Д.) От сочетанных инфекций легочных грибов. Ранее было показано, что мутации в репрессоре эффлюксного белка MmpS5-MmpL5 MmpR приводили к устойчивости к азолам, включая противогрибковый эконазол. ¹⁰ Тем не менее, эта гипотеза требует дальнейшего экспериментирования для проверки.
Не было обнаружено мутаций в pepQ , о котором недавно сообщалось в штаммах с низким уровнем устойчивости к бедаквилину, ¹¹ не обнаружено в изученных изолятах.Кроме того, замены в Rv1979c и pepQ ранее были связаны с устойчивостью к клофазимину, ²⁹ и мутации в Rv1979c также не были обнаружены; Таким образом, генетические механизмы повышенного МИК для 12 штаммов от семи пациентов еще предстоит раскрыть.
Среди изолятов, устойчивых к линезолиду, мутации t460c в гене rplC были наиболее частыми, что соответствует результатам предыдущих исследований. ¹⁸ Двойная мутация в положениях 460 и 462, приводящая к такой же аминокислотной замене, которая была обнаружена в одном случае, ранее не описывалась.Изоляты двух пациентов несли мутации в гене 23S рРНК, связанные с устойчивостью к линезолиду — хорошо известные g2814t и g2294a, которые ранее не были идентифицированы.
Смешанные субпопуляции патогенов были обнаружены примерно в 40% случаев, что было идентифицировано секвенированием по Сэнгеру ДНК, очищенной из изолированной культуры. Были обнаружены различные типы смесей, связанных с гетерорезистентностью: смесь WT и мутированной ДНК, а также смеси ДНК с различными мутациями, отражающие сложный характер эволюции патогена in vivo .Ограничением результатов может быть использование культур MGIT для анализа, что изменяет популяционное разнообразие, и значительный процент смешанных субпопуляций мог быть потерян во время культивирования. ³⁶
Смешанные туберкулезные инфекции и субпопуляции, которые развиваются от одного предшественника, часто выявляются в клинических образцах, ³⁷ влияя на тестирование чувствительности как фенотипическими методами ³⁸, так и молекулярными методами. ³⁹ Современные молекулярные подходы к обнаружению смешанных штаммов имеют ограниченную чувствительность в случае неизвестных мутаций, и наиболее информативным методом, вероятно, является подход секвенирования следующего поколения с чрезвычайно глубоким считыванием, выполняемым непосредственно на образцах мокроты.⁴⁰ Метод секвенирования по Сэнгеру, использованный в нашем исследовании, дает ~ 10-15% ложных отрицательных результатов для обнаружения SNP; ⁴¹, однако, эта скорость ниже для обнаружения инделей по сравнению с SNP из-за непрерывного характера вторичных пиков на хроматограмме после сайта с вставкой или делецией нуклеотида.
Наше исследование подтверждает предыдущие выводы о высоком разнообразии популяции внутри хозяина, выявленные в последующих изолятах от одного и того же пациента, получающего постоянное лечение.Мы выявили ранее существовавшую резистентность к бедаквилину у пациентов с ШЛУ и пациентов с приобретенной резистентностью к бедаквилину, линезолиду или обоим препаратам одновременно при селективном давлении терапии. Это убедительно указывает на необходимость тестирования на чувствительность максимального количества лекарств до их назначения и постоянного контроля во время лечения с использованием всех доступных методов.
Финансирование
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского научного фонда (грант №14-50-00060).
Заявления о прозрачности
Отсутствуют для объявления.
Дополнительные данные
Таблицы S1 – S3 и рисунок S1 доступны в качестве дополнительных данных в JAC Online.
Список литературы
1
Andries
K
,
Verhasselt
P
,
Guillemont
J
et al.
Диарилхинолиновый препарат, активный в отношении АТФ-синтазы Mycobacterium tuberculosis
.
Наука
2005
;
307
:
223
—
7
,2
Паломино
JC
,
Мартин
A.
TMC207 становится бедаквилином, новым противотуберкулезным препаратом
.
Future Microbiol
2013
;
8
:
1071
—
80
.3
Huitric
E
,
Verhasselt
P
,
Koul
A
et al.
Скорость и механизмы развития устойчивости у Mycobacterium tuberculosis к новому ингибитору диарилхинолиновой АТФ-синтазы
.
Противомикробные агенты Chemother
2010
;
54
:
1022
—
8
.4
Segala
E
,
Sougakoff
W
,
Nevejans-Chauffour
A
et al.
Новые мутации в микобактериальной АТФ-синтазе: новый взгляд на связывание диарилхинолина ТМС207 со структурой С-кольца АТФ-синтазы
.
Противомикробные агенты Chemother
2012
;
56
:
2326
—
34
.5
Petrella
S
,
Cambau
E
,
Chauffour
A
et al.
Генетическая основа естественной и приобретенной устойчивости микобактерий
к диарилхинолину R207910.
Антимикробные агенты Chemother
2006
;
50
:
2853
—
6
,6
Сомоскови
A
,
Bruderer
V
,
Homke
R
et al.
Мутация, связанная с перекрестной устойчивостью к клофазимину и бедаквилину при МЛУ-ТБ после лечения бедаквилином
.
Eur Respir J
2015
;
45
:
554
—
7
,7
Bloemberg
GV
,
Keller
PM
,
Stucki
D
et al.
Приобретенная устойчивость к бедаквилину и деламаниду в терапии туберкулеза
.
N Engl J Med
2015
;
373
:
1986
—
8
.8
Biukovic
G
,
Basak
S
,
Manimekalai
MS
et al.
Вариации субъединицы ɛ Mycobacterium tuberculosis F ₁ F _o АТФ-синтаза и новая модель механизма действия противотуберкулезного препарата TMC207
.
Противомикробные агенты Chemother
2013
;
57
:
168
—
76
. 9
Hartkoorn
RC
,
Uplekar
S
,
Cole
ST.
Перекрестная резистентность между клофазимином и бедаквилином за счет активации MmpL5 у Mycobacterium tuberculosis
.
Антимикробные агенты Chemother
2014
;
58
:
2979
—
81
.10
Milano
A
,
Pasca
MR
,
Provvedi
R
et al.
Устойчивость к азолам у Mycobacterium tuberculosis опосредуется системой оттока MmpS5-MmpL5
.
Tuberculosis (Edinb)
2009
;
89
:
84
—
90
.11
Алмейда
D
,
Ioerger
T
,
Tyagi
S
et al.
Мутации в pepQ придают низкий уровень устойчивости к бедаквилину и клофазимину у Mycobacterium tuberculosis
.
Антимикробные агенты Chemother
2016
;
60
:
4590
—
9
.12
Zhang
Z
,
Pang
Y
,
Wang
Y
et al.
Пекинский генотип Mycobacterium tuberculosis в значительной степени связан с устойчивостью к линезолиду при туберкулезе с множественной и широкой лекарственной устойчивостью в Китае
.
Int J Antimicrob Agents
2014
;
43
:
231
—
5
,13
Lee
M
,
Lee
J
,
Carroll
MW
et al.
Линезолид для лечения хронического туберкулеза с широкой лекарственной устойчивостью
.
N Engl J Med
2012
;
367
:
1508
—
18
.14
Рамирес-Лапауза
M
,
Паскуаль Пареха
JF
,
Каррильо Гомес
R
и др.
Ретроспективное исследование переносимости и эффективности линезолида у пациентов с туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью (1998-2014)
.
Enferm Infecc Microbiol Clin
2015
;
34
:
85
—
90
.15
Wilson
DN
,
Schluenzen
F
,
Harms
JM
et al.
Оксазолидиноновые антибиотики нарушают рибосомный пептидилтрансферазный центр и влияют на позиционирование тРНК
.
Proc Natl Acad Sci USA
2008
;
105
:
13339
—
44
.16
Hillemann
D
,
Rusch-Gerdes
S
,
Richter
E.
Отобранные in vitro линезолид-устойчивые Мутанты Mycobacterium tuberculosis
.
Антимикробные агенты Chemother
2008
;
52
:
800
—
1
,17
Длинный
KS
,
Вестер
B.
Устойчивость к линезолиду, вызванная модификациями его сайта связывания на рибосоме
.
Противомикробные агенты Chemother
2012
;
56
:
603
—
12
.18
Beckert
P
,
Hillemann
D
,
Kohl
TA
et al.
rplC T460C, идентифицированная как доминантная мутация в устойчивых к линезолиду штаммах Mycobacterium tuberculosis
.
Противомикробные агенты Chemother
2012
;
56
:
2743
—
5
.19
Борисов
ЮВ
,
Иванушкина
TN
,
Иванова
DA
и др.
[Эффективность и безопасность шестимесячных схем химиотерапии, содержащих бедаквилин, у больных туберкулезом легких]
.
Туберкулез и Социально Значимые Заболевания
2015
;
3
:
30
—
49
. http://elibrary.ru/item.asp?id=26142614.20
Морозова
ТИ
,
Отпущенникова
ОН
, Докторова
НП
и др.
[Опыт применения бедаквилина в лечении больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью]
.
Туберк Биолезни Легких
2016
;
94
:
29
—
35
. http://tibl-journal.com/ru/article/1016/.21
Иванушкина
TN
,
Борисов
SE
,
Литвинова
NV
и др.
[Линезолид в интенсивной фазе химиотерапии у больных туберкулезом органов дыхания с множественной и широкой лекарственной устойчивостью микобактерий]
.
Туберк Биолезни Легких
2011
;
88
:
34
—
41
.http://elibrary.ru/item.asp?id=16860555.22
Васильева
ИА
,
Самойлова
AG
,
Зимина
VN
и др.
[Опыт применения линезолида в комбинированном лечении больных туберкулезом с широкой лекарственной устойчивостью возбудителя]
.
Туберк Биолезни Легких
2011
;
88
:
17
—
20
. http://elibrary.ru/item.asp?id=16446509.24
Sharma
M
,
Thibert
L
,
Chedore
P
et al.
Канадское многоцентровое лабораторное исследование для стандартизированных тестов второй линии на чувствительность к противомикробным препаратам Mycobacterium tuberculosis
.
J Clin Microbiol
2011
;
49
:
4112
—
6
,25
Lounis
N
,
Vranckx
L
,
Gevers
T
et al.
Условия культивирования in vitro, влияющие на минимальную ингибирующую концентрацию бедаквилина против M. туберкулез
.
Med Mal Infect
2016
;
46
:
220
—
5
.26
Rusch-Gerdes
S
,
Pfyffer
GE
,
Casal
M
et al.
Многоцентровая лабораторная валидация методики BACTEC MGIT 960 для определения чувствительности Mycobacterium tuberculosis к классическим препаратам второго ряда и более новым противомикробным препаратам
.
J Clin Microbiol
2006
;
44
:
688
—
92
.27
Long
KS
,
Munck
C
,
Andersen
TM
et al.
Мутации в 23S рРНК в центре пептидилтрансферазы и их связь со связыванием линезолида и перекрестной устойчивостью
.
Противомикробные агенты Chemother
2010
;
54
:
4705
—
13
,28
Lange
C
,
Abubakar
I
,
Alffenaar
JW
et al.
Ведение пациентов с туберкулезом с множественной / широкой лекарственной устойчивостью в Европе: заявление консенсуса TBNET
.
Eur Respir J
2014
;
44
:
23
—
63
,29
Zhang
S
,
Chen
J
,
Cui
P
et al.
Идентификация новых мутаций, связанных с устойчивостью к клофазимину, у Mycobacterium tuberculosis
.
J Antimicrob Chemother
2015
;
70
:
2507
—
10
.30
Уэйд
MM
,
Волохов
D
,
Передельчук
M
и др.
Точное картирование мутаций устойчивых к пиразинамиду штаммов Mycobacterium tuberculosis с помощью олигонуклеотидного микрочипа со сканирующей рамкой
.
Диагностика Microbiol Infect Dis
2004
;
49
:
89
—
97
.31
Georghiou
SB
,
Magana
M
,
Garfein
RS
et al.
Оценка генетических мутаций, связанных с устойчивостью Mycobacterium tuberculosis к амикацину, канамицину и капреомицину: систематический обзор
.
PLoS One
2012
;
7
:
e33275
.32
Andries
K
,
Villellas
C
,
Coeck
N
et al.
Приобретенная резистентность Mycobacterium tuberculosis к бедаквилину
.
PLoS One
2014
;
9
:
e102135
.33
Torrea
G
,
Coeck
N
,
Desmaretz
C
et al.
Исследование чувствительности к бедаквилину Mycobacterium tuberculosis в автоматизированной системе жидких культур
.
J Antimicrob Chemother
2015
;
70
:
2300
—
5
.34
Черняева
EN
,
Шульгина
М.В.
,
Роткевич
МС
и др.
Полногеномная база данных Mycobacterium tuberculosis (GMTV): новый инструмент для интеграции вариаций последовательностей и эпидемиологии
.
BMC Genomics
2014
;
15
:
308
.35
Peterson
EJ
,
млн лет назад
S
,
Sherman
DR
et al.
Сетевой анализ определяет Rv0324 и Rv0880 как регуляторы толерантности к бедаквилину у Mycobacterium tuberculosis
.
Nat Microbiol
2016
;
1
:
16078
.36
Hanekom
M
,
Streicher
EM
,
Van de Berg
D
et al.
Популяционная структура смешанной инфекции Mycobacterium tuberculosis зависит от генотипа штамма и питательной среды
.
PLoS One
2013
;
8
:
e70178
.37
Sampson
SL.
Сила разнообразия: скрытые генетические глубины Mycobacterium tuberculosis
.
Trends Microbiol
2016
;
24
:
82
—
4
.38
Zhang
Z
,
Lu
J
,
Wang
Y
et al.
Автоматизированная система жидких культур пропускает гетерорезистентность к изониазиду у изолятов Mycobacterium tuberculosis с мутациями в промоторной области гена inhA
.
евро J Clin Microbiol Infect Dis
2015
;
34
:
555
—
60
.39
Чакраворти
S
,
Котари
H
,
Aladegbami
B
et al.
Быстрое и высокопроизводительное определение устойчивости к рифампину и гетерорезистентности у Mycobacterium tuberculosis с использованием неаккуратного молекулярного маяка с кодом температуры плавления
.
J Clin Microbiol
2012
;
50
:
2194
—
202
.40
Zhang
D
,
Gomez
JE
,
Chien
JY
et al.
Геномный анализ эволюции устойчивости к фторхинолонам у Mycobacterium tuberculosis до постановки диагноза туберкулеза
.
Антимикробные агенты Chemother
2016
;
60
:
6600
—
8
.41
Eilertson
B
,
Maruri
F
,
Blackman
A
et al.
Высокая доля гетерорезистентности у gyrA и gyrB в устойчивых к фторхинолонам клинических изолятах Mycobacterium tuberculosis
.
No related posts.